毛海萍，叶 繁，赵巧灵，金仁耀，吴佳佳*，戴志远

    (1 浙江工商大学海洋食品研究院 杭州 310012 2 舟山市食品药品检验检测研究院 浙江舟山 316000)

    抗生素被广泛用于人类、畜牧业及鱼类养殖的疾病预防和治疗，抗生素诱导细菌产生的抗生素耐药基因(Antibiotic resistant genes，ARGs)已成为一种新型环境污染物，其污染分布广泛且危害持久。ARGs 借助质粒、转座子、整合子等可移动的基因元件在不同的细菌菌群间发生水平转移，同时，菌体裂解释放的ARGs 能够被其它细菌再次捕获、整合，从而使其在微生态环境中迁徙、污染[1]。

    水产养殖是中国农业结构中发展最快的产业之一，2018年中国水产养殖产量超5 000 万t(占水产总量的78%)，为居民提供了丰富的优质蛋白供给[2]。然而，养殖水环境抗生素污染引起的水产品ARGs 污染问题也日趋严重而不容忽视。医疗及畜牧养殖废水中抗性基因或耐药菌会通过污水排放、水循环进入养殖水体，造成养殖环境抗生素和ARGs 本底水平升高[3]。同时，水产养殖过程中大量投放的抗生素进一步诱导ARGs 的产生并促进其转移[4]，养殖水体环境正在逐渐成为一个巨大的ARGs 储存库。张瑞泉等[5]测定鱼塘养殖环境中11 种四环素类耐药基因(tetA，tetB，tetC，tetD，tetA，tetM，tetO，tetQ，tetS，tetW，tetX)，3 种磺胺类耐药基因(sul1，sul2，sul3)，2 种整合酶基因(int1，int2)的分布特征及丰度水平，结果显示：14 种抗生素耐药基因及2 种整合酶基因在鱼塘养殖环境中广泛检出，表明养殖鱼塘及污水环境广泛受到抗生素耐药基因的污染。马辰婕等[6]发现与细菌多重耐药性快速传播相关的复合I 型整合子在水产养殖环境中并不少见，且存在于多种细菌中。水产品中携带抗生素耐药基因的耐药菌株的种类和数量日益增加，不仅影响抗生素的治疗效果，抗生素耐药基因向环境和食物链的迁移，也对环境及人类健康造成极大威胁[7]。

    本研究选取杭州市菜场销售的鲫鱼、黄颡鱼、大黄鱼和沼虾4 种常见水产品，选择水产养殖中常用的磺胺类、四环素类、氨基糖苷类、β-内酰胺、喹诺酮类、氯霉素类几种抗生素对应的抗性基因作为研究对象，对其常见基因tetA、sul2、blaPSE、cmlA、qnrS、aac(6')-Ib、intⅠ1 进行检测。采用实时荧光定量，以水产品携带细菌总DNA 为模板，探究其常见ARGs 和I 类整合子的数量及分布。

    1 材料与方法 ......