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编号:39295
牡蛎低聚肽的结构表征及体外抗氧化作用
http://www.100md.com 2022年1月10日 2021年第12期
自由基,氨基酸,1材料与方法,1材料与仪器,2试验方法,2结果与分析,1牡蛎低聚肽的基础理化成分,2牡蛎低聚肽的氨基酸组成,3牡蛎低聚肽的相对分子质量分布,4牡蛎低聚肽的结构表征,5牡蛎低聚肽的体外抗氧化作用,3结论
     刘文颖,冯晓文,李国明,张江涛,张新雪,谷瑞增

    (1 中国农业大学工学院 北京 100083 2 中国食品发酵工业研究院有限公司 北京市蛋白功能肽工程技术研究中心 北京 100015)

    牡蛎(Ostrea)又名生蚝,是世界上第一大养殖贝类,也是我国重要的养殖贝类。牡蛎肉中含有丰富的蛋白质、氨基酸,营养价值高,有“海洋牛奶”之称。通过蛋白提纯、生物酶解、分离纯化、喷雾干燥等步骤加工制得牡蛎低聚肽,是牡蛎高值化利用的有效途径[1-2]。牡蛎低聚肽主要成分为短肽,具有相对分子质量小,适热能力强,乳化效果好,易被机体吸收和具有新的生物活性等优点[3-4]。

    抗氧化活性肽是生物活性肽的一种,能够清除自由基,抑制或消除氧化反应,降低氧化速率和过氧化物含量,保护细胞抵御氧化应激损伤,从而达到抗衰老的功能[5]。与化学抗氧化剂相比,动、植物来源的抗氧化活性肽安全性高,无毒副作用,作为天然抗氧化剂在食品和医药行业中具有较大的竞争力,是研究人员探索最多的一种生物活性肽。目前文献报道了乌鸡、鸡蛋、牛奶、大豆等多种蛋白来源活性肽的抗氧化作用,有研究表明抗氧化肽的活性与其结构有关[5-7]。目前,关于牡蛎低聚肽结构和抗氧化作用的系统研究鲜见报道。

    本研究以去壳牡蛎肉为原料,经生物酶解、分离纯化等步骤制得牡蛎低聚肽,在对其基础理化成分、氨基酸组成、相对分子质量分布分析的基础上,用扫描电镜、紫外全波长扫描和圆二色光谱对其结构进行表征,通过DPPH 自由基清除能力、ABTS 自由基清除能力、氧自由基吸收能力(ORAC)和还原能力4 种体外化学评价体系探讨其抗氧化能力,为牡蛎低聚肽在抗氧化功能性食品的开发方面提供理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料与仪器

    冷冻去壳牡蛎肉,北京中食海氏生物技术有限公司提供;碱性蛋白酶(≥400 000 DU/g)、中性蛋白酶(≥1 600 AU/g),杜邦丹尼斯克公司;分子质量标准品、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、偶氮二异丁脒盐酸盐(AAPH)、Fluorescein(荧光指示剂)、Trolox(水溶性维生素E),美国Sigma 公司;乙腈(色谱纯),美国Fisher 公司;ABTS 自由基清除能力测定试剂盒,碧云天生物技术研究所;其它分析纯试剂,北京化工厂。

    UV-1780 紫外可见分光光度计,日本SHIMADZU 公司;Spectra MR 多功能酶标仪,美国dynex 公司;LC-20A 高效液相色谱仪,日本SHIMADZU 公司;SpectraMax i3x 多功能酶标仪 ......

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