壶瓶碎米荠多糖的提取、分离及抗氧化活性研究
液料,自由基,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3试验方法,4统计分析,2结果与分析,1单因素实验结果,2响应面试验结果与分析,3除蛋白结果,4碎米荠多糖纯化工艺,5纯度鉴定结果,6抗氧化试验结果,3结论
李美东,黄秀芳,罗 凯(湖北民族大学生物科学与技术学院 湖北 恩施 445000)
多糖 (Polysaccharide) 是由大量通过糖苷键(α-或β-) 脱水聚合相互连接而成的单糖残基组成的一种生物大分子物质[1]。自然界中,几乎所有活的生物体中都含有多糖。人们习惯上把从生物体中提取的并通过研究证明具有一定生理活性的多糖称为生物活性多糖 (Bioactive polysaccharides)。近年来,由于人们日常生活水平的提高和对身体健康知识的逐步了解,生物活性多糖因本身的低毒性、广泛性和高效性等特点而被作为营养补充剂被大量的研究。多糖的生物活性主要包括增强免疫调节[2-3]、抗氧化[4-5]、抗病毒[6-7]、抗肿瘤[8-9]、降血糖[10]、降血脂[11]、抗凝血[12]等。
壶瓶碎米荠(Cardamine hupingshanensis),十字花科碎米荠属,别名雀儿菜、白带草,1年到2年生草本植物,常见于海拔1 km 以下的低地草丛中,在全中国分布广泛[13]。壶瓶碎米荠具有较强富硒能力。现有研究中,对碎米荠属的基因组学研究主要有:①基因组学研究,如:Bleeker 等[14]对德国的碎米荠种属的DNA 序列进行研究,得出结论:此种碎米荠是来自于亚洲的物种;②蛋白质组学研究,如:Both 等[15]通过检测壶瓶碎米荠中的无机硒、有机硒,得出壶瓶碎米荠生物体内无机硒占20%,有机硒以硒代半胱氨酸和硒代甲硫氨酸的形式存在;③硒耐受能力测试[16-17],Zhou 等[2]从壶瓶碎米荠中组装48 989 个单基因,分别在根和叶中表达39 579 个和33 510 个。通过差异表达分析鉴定出位于4 个不同路径中的25 个基因,这些路径对壶瓶碎米荠中的亚硒酸盐有显著响应;④品种改良[18]等方面研究。
本试验中采用超声波与酶辅助提取壶瓶碎米荠多糖,采用Sevag 法除蛋白,通过DEAE-52 纤维素分级醇沉,采用Sephadex G-100 和紫外光谱法进行纯度鉴定,并研究其体外抗氧化活性。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
壶瓶碎米荠,采自湖北省恩施市新塘乡渔塘坝。自然风干后粉碎过100 目筛,贮存于试剂瓶中保存备用。
纤维素酶、标准葡萄糖、DEAE-52 纤维素、Sephadex G-100 葡聚糖、乙醇、苯酚、硫酸、三氯甲烷、正丁醇均为分析纯级。
1.2 仪器与设备
Nicolet iS5 红外分析仪,赛默飞世尔公司;KQ5200 型超声波仪 ......
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