南极磷虾油对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应的抑制作用
抗炎,1材料与方法,1材料与试剂,2主要设备与仪器,3方法,4数据统计分析,2结果与分析,1南极磷虾油脂肪酸组成及微量物质的含量分析,2细胞形态变化,3细胞吞噬能力的变化,4MPO的变化,5NO的变
郑振霄,朱 凯,戴志远*(1 浙江工商大学 海洋食品研究院 杭州 310012 2 浙江工商大学 浙江省水产品加工技术研究联合重点实验室 杭州310012)3 浙江工商大学 海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心 杭州 310012)
南极磷虾(Euphausia superba)是生活在南极海域的一种甲壳类浮游生物。据统计,南极磷虾的资源储存量约为3.80 亿t,并且每年的繁殖量也非常巨大,在3.42~5.36 亿t 之间。 目前,南极磷虾的捕捞量约为20 万t/年,仅为其限制性捕捞量的1/3,这表明全球南极磷虾资源开发潜力巨大[1-2]。南极磷虾主要被加工成饵料,用于水产养殖等行业,然而,因养殖量有限且养殖饵料资源丰富,故南极磷虾资源的利用率并不高[3]。 近年来,随着人们对南极磷虾营养价值的认可,南极磷虾功能食品成为开发利用其资源的重要途径。 南极磷虾中富含磷脂结合型n-3PUFA,与鱼油中的甘油酯型的n-3PUFA 相比,更容易被人体吸收,因此南极磷虾油成为南极磷虾资源高效利用的一种潜力产品[4]。
炎症,即平时所说的“发炎”,是生物组织受到某种刺激,如外伤、感染等损伤因子的刺激,所发生的一种以防御反应为主的基本病理过程。 研究表明,海洋脂质对炎症具有抑制作用[5]。付元庆[6]以脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7 细胞为炎症的体外模型,研究了厚壳贻贝脂质提取物对炎症的抑制作用,结果表明:厚壳贻贝脂质提取物可以显著抑制一氧化氮(NO)的释放,调节促炎/抗炎因子平衡,并最终通过抑制核转录因子NF-κB 的活化,抑制炎症级联反应。孙翰[7]采用硫酸葡聚糖钠诱导的C57BL/6 小鼠为炎症模型,研究鱼油对溃疡性结肠炎小鼠体内炎症反应的抑制作用,结果表明:鱼油可以通过抑制花生四烯酸代谢通路,抑制促炎因子IL-1β 的表达,进而抑制炎症反应。 目前,对于南极磷虾油的研究主要集中在其制备工艺及抗氧化,关于南极磷虾油抗炎的研究较为少见。本文以LPS 诱导的RAW264.7 细胞为炎症模型,研究南极磷虾油的抗炎功效,并从基因水平分析南极磷虾油对炎症因子及关键酶的调控作用,初步探索南极磷虾油抗炎的作用机理,旨在为南极磷虾资源的开发与利用提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
巨噬细胞RAW264.7,中国科学院上海细胞库;南极磷虾油,实验室自制,制备方法参考俞喜娜等[8]的方法;胎牛血清,浙江天杭生物科技股份有限公司;DMEM 高糖培养基,海克隆生物化学制品(北京)有限公司;青霉素-链霉素溶液、胰酶、LPS ......
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