驼乳对小鼠急性酒精性肝损伤的干预作用
差异基因,测序,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3方法,4肝脏组织RNA提取及cDNA文库构建,5转录组数据处理及分析,6实时荧光定量PCR验证相关差异基因,7数据统计与分析,2结果与分析,1驼乳对肝损伤小鼠肝组
其布勒,吉日木图,2,明 亮,2*(1 内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室 呼和浩特 010018 2 内蒙古骆驼研究院 内蒙古阿拉善 750306)
肝脏是人体最重要的代谢器官,也是酒精代谢的中心,超过80%的摄入酒精在肝脏代谢[1]。随着酒精消费的增加,酒精性肝病(ALD)的发病率越来越高,已成为一个严重的健康问题,引起了全世界的关注[2]。根据肝损伤的严重程度,酒精性肝病包括酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝纤维化、酒精性肝硬化和酒精性肝癌[3]。研究ALD 的发病机制对治疗及干预病情的发展具有重大意义[4]。
骆驼是荒漠地带的一种特有畜种,对荒凉、贫瘠、严酷的荒漠环境具有较强的适应能力,也造就了驼乳“沙漠白金”的美称;其营养成分独特,含有丰富的蛋白质、不饱和脂肪酸以及磷、钙、钾等矿物质元素和维生素B、C、E 等营养成分,易于消化吸收,是有较高的营养价值和食疗保健作用的饮品[5-8]。此外,驼乳还含有高水平的生物活性物质,如乳过氧化物酶、免疫球蛋白G(IgG)、分泌性免疫球蛋白A(SIgA)、乳铁蛋白、溶菌酶、胰岛素、类胰岛素生长因子等,使其具有优异的抗氧化和抗菌活性[9-10]。有研究表明,驼乳及其成分还具有其它潜在的功能特性,如抗致癌[11-12]、抗糖尿病[13]、抗高血压[14]和肾保护潜力[15-16]。
目前,驼乳的功用价值已引起世界各地研究人员的极大关注。为进一步探索驼乳对酒精所致肝损伤的改善作用,本研究以ICR 小鼠建立急性酒精肝损伤的动物模型,通过给酒精性肝损伤小鼠灌胃驼乳,研究其对肝损伤的预防作用。采用比较转录组学技术探究驼乳对急性酒精性肝损伤的分子调控机制,旨在为利用驼乳开发保肝功能食品或膳食补充剂提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
清洁级(SPF)雄性ICR 小鼠,由北京维通利华实验动物中心提供。
谷丙转氨酶(ALT)试剂盒、谷草转氨酶(AST)试剂盒,南京建成生物有限公司;总RNA 提取试剂盒,Life Technologies 公司;反转录试剂盒,Thermo Fisher Scientific 公司;扩增试剂盒,Luna公司;肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、白介素-1β(IL-1β)试剂盒,上海酶联生物有限公司。
1.2 仪器与设备
酶标仪、荧光定量PCR 仪,美国Thermo 公司。
1.3 方法 ......
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