马瑞雪，寇婷婷，孙霞芝，范艳丽

    (宁夏大学食品科学与工程学院 银川 750021)

    枸杞(Lycium barbarum L.)属茄科，多年生落叶灌木，是我国珍贵的传统药用植物[1]，也是药食同源品种之一[2]，具有抗炎、抗老和神经保护等多种生物学功能[3-5]。其种植区域从传统的宁夏中宁产区，逐渐扩展为“宁夏道地产区为核心，青海、甘肃、新疆、内蒙为两翼”的大枸杞种植区[6]。枸杞多糖(Lycium Barbarum polysaccharides，LBP)是 枸杞的主要活性成分，是一种有效的抗氧化剂[7]。由于环境因素不同，导致不同产地枸杞的品质存在很大差异[8]，而枸杞多糖结构和活性是否存在典型的地区差异，对其质量评价和产品研发有至关重要的作用[9]。

    基于同位素标记相对和绝对定量(Isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation，i-TRAQ)技术的蛋白组学分析，广泛应用于植物蛋白的识别和定性、定量分析中，该技术可同时比较8 个样品的表达量[10]。目前关于不同产区枸杞多糖的研究已有报道。Wang等[9]的研究发现，青海产地的枸杞果实明显大于宁夏和新疆，而其产量低于其它产地，研究还发现不同产地枸杞多糖的单糖组成、分子质量和构象相似，抗氧化和免疫活性结果也一致。徐金楠等[11]通过对不同产地枸杞多糖结构特征对比，发现不同产地的枸杞多糖结构相似，且环境因素对多糖糖环形式和单糖组成的影响比品种因素大。在蛋白水平探究不同产地枸杞多糖差异的相关报道较少，课题组前期比较了不同产地枸杞多糖的含量、分子质量、单糖组成以及结构特征，通过iTRAQ 技术比较枸杞蛋白表达差异[12]，而未分析枸杞多糖的相关蛋白。本文基于前期iTRAQ 定量蛋白组学技术，对不同产地“宁杞1号”枸杞果实的蛋白质进行分析，筛选出与枸杞多糖合成代谢相关的蛋白质，并初步推测枸杞多糖合成代谢相关通路，为不同产地枸杞多糖的差异提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    SDS(色谱纯)、Urea(色谱纯)、二硫苏糖醇(色谱纯)、碘乙酰胺(色谱纯)，美国Bio-Rad 公司；碳酸氢铵(色谱纯)、Tris(色谱纯)、三氟乙酸(色谱纯)，美国Sigma-Aldrich 公司；甲酸(色谱纯)，德国Fluka 公司；乙腈(色谱纯)，德国Merck 公司；其它试剂均为国产分析纯。

    1.2 设备与仪器

    液相色谱系统(Easy nLC)、质谱仪(Q Exactive)、微量紫外光度计(2000c)、酶标仪(Multiskcan FC) ......