HPTLC 联用像素与光密度法快速定量茶饮料中的EGCG
点样,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3试验方法,2结果与讨论,1HPTLC-光密度检测方法的建立,2HPTLC-光密度方法验证,3HPTLC-ImageJ定量方法的建立,4HPTLC-Ima
张延杰,胡志高,席兴军,卫晓,刘霭莎,李汴生,陈益胜,5*(1 咀香园健康食品(中山)有限公司 广东中山528414 2 中国标准化研究院 北京100191 3 江南大学食品学院 江苏无锡214122 4 华南理工大学食品科学与工程学院 广州510641 5 山西农业大学食品科学与工程学院 山西太谷 030801)
茶鲜叶中富含多酚类物质,其含量约占茶鲜叶干质量的18%~36%,其中儿茶素含量最高,约占多酚总量的70%。儿茶素化合物属于黄烷醇类,其基本结构是2-苯基苯并吡喃。从茶叶中分离鉴定的儿茶素多为表型儿茶素,主要有4 种,表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG),其中EGCG 在儿茶素中含量最高[1-4],占儿茶素总量的50%~80%,具有重要的保健功效。
近年来,诸多研究证明绿茶的健康促进作用主要归因于EGCG[5-6]。EGCG 具有抗氧化、杀菌、抑病毒、消炎、减肥等多种功效[7-12]。Azambuja等[13]研究表明,绿茶EGCG 具有抗炎活性,其作用机制为儿茶素可以清除体内活性氧,调节炎症信号通路,抑制炎症发生。茶提取物尤其是绿茶提取物和茶多酚可以抑制动物模型中不同器官肿瘤的形成和发展。有研究表明,茶多酚特别是EGCG,可抑制酶活性和信号转导途径,从而抑制细胞增殖和增强细胞凋亡,并抑制细胞入侵[14]。Suzuki等[15]研究表明,绿茶具有抗癌、抗肥胖、抗动脉粥样硬化、抗糖尿病、抗菌、抗病毒等活性,这些活性与EGCG的功效密切关联。Al-Basher等[16]研究表明,EGCG可以通过抑制肝脏铁蓄积来改善铁超负荷引起的大鼠肝毒性、细胞凋亡和氧化应激,改善肝脏抗氧化能力[17]。此外,通过测定EGCG 含量,可以进行茶叶分级,茶叶处理工艺合理性判断,茶饮料质量辨析等[18],具有重要的应用意义。
目前,已有多种方法用于测定茶叶及茶饮料中的儿茶素,如高效液相色谱-二极管阵列检测(HPLC-DAD)[19]、高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)[20],衍生后的气相色谱-质谱(GC-MS)[21]等。最常用的方法始终基于HPLC 分离[22-25],然而,基于HPLC的方法存在分析时间长和溶剂浪费的局限性。需要建立一种通量和性价比高的方法来直观地表征茶产品中的EGCG。
在前期研究中,曾提出以HPTLC 为平台,结合光密度检测对显色结果进行扫描定量分析的方法[26-27]。然而,此方法在实际应用中存在仪器(光密度扫描仪)单价昂贵和通用性差的问题 ......
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