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编号:12835857
5_氮杂_2’_脱氧胞苷对内皮祖细胞分化的影响及机制研究刘加远(1)
http://www.100md.com 2016年4月1日 《心脑血管病防治》 2016年第2期
     [摘要]目的探讨5_氮杂_2’_脱氧胞苷诱导内皮祖细胞分化为内皮细胞的作用及初步机制研究。方法收集脐带血,Ficoll_Paque淋巴细胞分离液和6%羟乙基淀粉沉降法分离获得单核细胞并培养,采用免疫组化及倒置相差显微镜鉴定细胞为内皮祖细胞(EPCs),EPCs培养7d后,分别加入1μmol/L(即dC1组),3μmol/L(即dC2组)5_Aza_dC的培养液,阴性组为采用00076%DMSO进行干预。流式细胞术检测5_Aza_dC处理后第0、3、7d后CD34+、CD31+的表达,RT_PCR分析VE_cadherin、Tie_2及vWF基因表达,western blotting检测vWF蛋白表达,MSP法检测BMP4基因CpG岛甲基化表达情况。结果①单核细胞经倒置相差显微镜及VE_cadherin、Tie_2、vWF、KDR、CD34及CD133等因子证实为EPCs;②流式细胞术结果显示,dC2组在经5_Aza_dC处理后的第3d、第7d CD34+(分别为302%、67%)降低,同阴性组(467%、408%)比较差异具有统计学意义(均P<005);dC2组在经5_Aza_dC处理后的第7d C CD31+(479%)升高 ......
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