中华眼镜蛇毒膜毒素诱导膀胱癌细胞凋亡的检测
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摘要:目的 研究中华眼镜蛇毒膜毒素(MT—12)诱导膀胱癌细胞的凋亡作用,比较检测凋亡的几种方法。方法 MT—12作用于体外培养的人膀胱癌(BIU-87)细胞,HE染色、Hoechest 33342荧光染色、透射电镜观察凋亡细胞的形态变化,DNA琼脂糖凝胶电泳观察DNA片段,AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术定量检测凋亡率。结果 3种形态学检测方法均能观察到细胞凋亡的形态学变化。3 ug/mL MT作用2、4、8、12、24 h和36 h,双染法流式细胞术检测的细胞凋亡率分别是46.94%、51.2%、28.85%、20.43%、6.03%和5.19%,阴性对照组凋亡率为0.77%。DNA电泳未能检测到细胞凋亡的DNA ladder。结论MT-12能诱导体外培养的BIU—87细胞凋亡,且具有时间依赖性。透射电镜观察凋亡细胞的形态特征最可靠。AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术定量检测细胞凋亡,其特异性、敏感性、重复性和准确性高。
关键词:膀胱肿瘤;癌;膜毒素;凋亡
中图分类号:R737.14;Q255 文献标识码:A
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