结核分支杆菌ESAT-6基因蛋白的表达
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2008年3月1日
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[中图分类号]R825.2 [文献标识码]A [文章编号]1185-1672(2008)-08-0204-02
摘要：目的 构建致病性结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶(Early secretory antigenic target，FSAT-6)基因的pET原核表达载体，诱导表达并初步鉴定该蛋白。方法 设计特异性引物，用PCR方法从结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组中扩增ESAT-6基因，产物通过双酶切克隆入pET-32a(+)质粒，经PCR、酶切、测序等方法鉴定后，转入大肠杆菌BL21菌体中IPTG诱导表达，并经镍柱纯化、Western-blotting鉴定。结果 所获得ESAT-6基因序列与GenBank公布的完全一致；表达融合蛋白分子量约25kDa，并能与特异性单抗结合，具有一定活性。
关键词：结核分枝杆菌；早期分泌性抗原靶ESAT-6；载体构建；融合表达
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