脂肪干细胞的分离培养及相关研究
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2008年6月1日
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摘要 目的研究脂肪干细胞的体外培养方法和生物学特性。方法 原代ADSCs培养取材自5月龄健康新西兰大白兔。Gi—emsa染色观察培养细胞形态，CD34，CD44，CD105抗体标记，运用流式细胞仪进行ADSCs鉴定。使用第3代细胞，加入含有10ng/mLTGF—β1的培养基向软骨细胞诱导，连续诱导1周；应用含有10umol/L的5-aza的完全培养液向心肌细胞诱导。番红花O染色和二型胶原染色鉴定软骨细胞表型；横纹肌肌动蛋白及心肌特异性肌钙蛋白T免疫细胞化学染色鉴定心肌细胞特异性抗原。结果流式细胞仪检测结果示，第3代ADSCs高表达间充质干细胞特异抗原CD44、CD105，不表达CD34；经TGF-β1诱导1周后，ADSCs呈软骨细胞样生长，番红花O染色和二型胶原染色阳性；经5-aza诱导24h后，细胞形态变为不规则星状及杆状，类似于心肌样细胞生长。诱导后21d免疫细胞化学检测横纹肌肌动蛋白及心肌特异性肌钙蛋白T呈阳性。结论 ADSCs是真正意义上的间充质干细胞，具有良好的多向分化潜能，在组织工程学及干细胞移植领域有着良好的应用前景。
关键词 脂肪干细胞；细胞培养；流式细胞术；细胞分化
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