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对生理学实验“尿生成的调节”的几点看法
http://www.100md.com 2016年4月1日 《现代养生·下半月》2016年第4期
     [摘要]尿生成实验是生理学动物实验中结果较难控制的实验,由于家兔和操作者的原因,往往造成实验失败。在总结了以往失败经验基础上,通过对实验观察项目及操作细节做了调整后,实验的成功率显著提高了,使尿生成实验能顺利开展,同时也增强了学生的自信心。

    [关键词]生理学;尿生成;实验

    影响尿生成的因素是生理学中一个重要的实验,其目的是通过实验了解影响尿生成的各种因素,加深学生对尿生成调节机制的理解。但是,尿生成实验对操作者的熟练程度及家兔本身的适应能力有较高的要求,根据实验中出现的问题总结的失败原因主要有这些:家兔个体差异大,家兔常出现少尿、无尿,用计数尿滴数的方法记录尿量多少不切实际;实验中反复多次注射耳缘静脉,学生操作不熟练,家兔耳缘静脉容易被破坏实验项目多、耗时长、2个学时的时间往往做不完;针对上述情况,实验室经过长期教学的实践,将实验做了相应调整以提高实验的成功率。

    1 几种常用家兔尿液收集方法比较

    目前收集尿液的方法主要有膀胱插管法、输尿管插管法、尿道插管法等。输尿管插管法,因为常导创伤性无尿,现在已经很少使用。尿道插管法对于学生来说,首次操作很难成功,而多次插入会引起尿道血肿而影响尿液的排放。虽然对家兔手术损伤较小,但实际成功率并不是很高,而且该方法要求性别是雄兔,在实际使用时有一定的限制性。本实验室在多次实验教学中发现,膀胱插管手术成功率更高一些,不管学生是否熟练都能操作成功,学生也可以直接看到膀胱和输尿管的解剖结构,而且做膀胱插管的手术创伤一般情况下家兔都能承受,极少因为膀胱插管而导致创伤性无尿。具体操作方法是:从耻骨联合向上沿中线作长约4厘米的切口,沿腹白线打开腹腔,将膀胱轻拉到腹壁外,先辨认清楚膀胱和输尿管的解剖部位,用线结扎膀胱颈部以阻断它同尿道的通路。用止血钳提起膀胱前壁(靠近顶端部分),选择血管较少处,切一纵行小口,插入插管后膀胱即随着尿液的流出而缩小。如膀胱壁较松驰而膀胱容积仍较大时,可用粗线将膀胱扎掉一部分,使膀胱内的贮尿量减至最少。使插管尿液流出口处低于膀胱水平,用小烧杯盛接由插管流出的尿液,手术完毕后,用温热的生理盐水纱布覆盖腹部创口。

    2 如何减少对家兔耳缘静脉的损伤

    家兔耳缘静脉的特点是:静脉沿耳背后缘走行,覆盖在静脉皮肤上的毛必须先拔去或剪去,用手指轻弹血管,使兔耳血流增加,并在耳根将耳缘静脉压迫,以使其血管怒张。但往往由于学生操作不熟练,出现注射阻力较大或局部肿胀,导致药物漏出或渗入组织内,使药物不能充分吸收,达不到用药的目的。而且,实验内容要求多次注射,不可避免对血管造成破坏,常常耳缘静脉堵塞严重,使实验无法进行下去。为了解决这个问题,用下面这个方法就能解决,耳缘静脉注射采用一次性静脉输液器,准备好输液架,250ml生理盐水,由于耳朵上有毛不能用胶布固定,可用1-2个动脉夹固定效果较好。给药时,输液器本身可以控制开关,而且前端针头处可断开给药,时间长了可以少量注射肝素,防止针头被血堵住。但要注意的是操作中防止大量空气进入。

    3 尿量的观察方法

    由于手术操作刺激或家兔本身的原因,家兔经常出现少尿或无尿,为了增加家兔的基础尿量,使实验效果明显,可以调整一下实验项目的顺序。

    (1)给家兔输液,增加家兔的基础尿量,在实验过程中要严格控制输液滴数,约2滴/10秒,这样输入的生理盐水量不会影响到动脉血压。注射约15分钟左右就可见尿液排出,观察尿液的滴速。

    (2)静脉给药去甲肾上腺素,如果见尿液滴速慢下来了,说明去甲肾上腺素起作用了。

    (3)注射20%葡萄糖溶液5ml,待尿滴速加快时,立即进行尿糖定性实验或用尿糖试纸检测,阳性说明有尿糖。

    (4)静脉注射速尿,由于速尿药效较大,虽然注射葡萄糖时尿滴速有所增加,但速尿的效果更加明显,尿滴速更快,可以很明显的观察到效果。

    (5)在时间允许的情况下,让学生分离颈总动脉,进行动脉插管,根据家兔体重放血20-30ml来降低血压,观察尿滴速,分析血压降低对尿量的影响。

    按照上述顺序,理论上尿量先增加再减少,实验中则表现为尿滴速先快后慢,方便学生肉眼观察。但此方法受家兔个体差异的影响,实验项目之间等待的时间无法确定,根据多年的经验大概在15分钟之内看到变化。

    “尿生成的影响因素”是机能学实验经典实验项目之一,让学生掌握家兔的基本手术操作,同时观察多种因素对家兔尿量的影响并分析机制。在进行了一系列尝试改革,比如利用静脉输液的方法可以减少家兔耳缘静脉注射的次数,选择更适宜的手术方式、调整实验项目顺序及对家兔尿滴速比较观察,极大的提高了手术成功率,增强了学生的自信心,达到一定的教学目的。实验方法改进以前,六个实验组2学时最多成功完成一至两个组,差一点的班级六个组都实验失败,改进以后,多数班级六个组均能成功完成,效果明显。但是,此实验还存在一些无法解决的问题,如家兔个体差异及健康状态也常常会影响实验的效果,特别对于一些中专或专科学校来说,要获得标准的试验用家兔,需要学校经费的支持。其实,在现实实验教学中,实验室用家兔都是从市场购买的,个体差异较大。 (杨青)