(4)转染48小时后将含有病毒颗粒的细胞培养基上清液转移至新的15ml无菌离心管，再在细胞培养皿中加入3ml新鲜培养基继续培养。

    (5)24h后再次收取细胞培养基上清，与前次收取的含有病毒颗粒的细胞培养基合并，室温下2000rpm，离心5min，用滤器过滤上清液到新无菌管中。

    1.2.4.2 用慢病毒侵染细胞 (1)将待侵染的细胞传代至3.5cm细胞培养皿中，当细胞贴壁时，吸弃细胞培养基。并将病毒悬液滴加在细胞表面，加入0.5ul 10mg/ml polybrene后混匀，37℃恒温箱培养。 (2)侵染8小时后吸弃细胞培养皿中的液体，加入2ml新鲜的细胞培养基继续培养。 (3)在细胞生长为80%，将细胞传代至6cm细胞培养皿。细胞生长到80%细胞培养皿时，继续传代。

    (4)24小时后，用加相应抗生素的培养基換液，大约7天后，存活下来的即为被慢病毒成功侵染的细胞 ......