2.3 RT-PCR

    用Trizol提取总RNA。反转录条件：37℃ 15min;85℃ 5s;4℃ 1min。20μL的PCR体系，其中SYRB Green为10μL，6.8μL的dH2O，上游和下游引物各0.4μL，0.4μL的Rox，cDNA为2μL。PCR条件：预变性95℃30 s，变性95℃5 s，退火60℃30 s，共40个循环。内参为GAPDH，mRNA用2-ΔΔct计算。

    2.4 ELISA测定

    收集细胞，按照ELISA试剂盒操作。试剂盒购自北京东格维业生物技术有限公司。

    2.5免疫沉淀

    甲醛交联和细胞超声处理用于免疫沉淀，收集特异性DNA并严格按照试剂盒说明使用q-PCR分析H3K56和H4K5乙酰化。试剂盒购自武汉爱宝泰生物技术有限公司。

    2.6 统计分析

    数据分析软件用SPSS 22.0，计量资料采用“均值±标准差”表示，组间均数比较采用t检验 ......