miRNA-374对缺血再灌注损伤的保护作用(2)
1.2 实验分组取指数生长的细胞,进行分组实验。分为空白组(Blank)、阴性对照组(NC)(转染miRNA-374阴性对照序列),miRNA-374模拟组(转染miRNA-374模拟基因),miRNA-374抑制剂组(转染 miRNA-374抑制剂)、siRNA-DTNA组(转染siRNA-DTNA)和miR-374抑制剂siRNA-DTNA组(转染miRNA-374抑制剂和siRNA-DTNA)。
1.3 试验方法
将对数生长心肌细胞种植在六孔板中。当细胞密度达到30%~50%时,按脂质2000(Invitrogen,Carlsbad,CA)的说明转染。分别取各实验组细100 pmol,用250μL无血清Opti-mem培养基(Gibco,Grand Island,NY)稀释后在室温下孵育5分钟。同时将250μL无血清Opti-MEM培养基与5μL Lipofectamine2000混合,室温孵育5分钟 ......
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