颅脑损伤后移植神经干细胞诱发的淋巴细胞浸润(1)
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【摘要】目的探讨在外伤性脑损伤的条件下，移植同种异体神经干细胞所诱发的淋巴细胞浸润现象。方法60只SD大鼠随机分配到实验组(n=30)和对照组(n=30)，制作脑损伤模型，实验组将Wistar大鼠来源的神经干细胞移植到损伤灶，对照组注射等量生理盐水。通过脑组织切片HE染色、免疫组织化学以及流式细胞术检测局部淋巴细胞浸润的表现，并通过流式细胞术检测神经干细胞的MHC-Ⅰ分子。结果神经干细胞表达MHC-Ⅰ分子的阳性率为6.57%±0.44%。HE染色和免疫组织化学显示，实验组脑损伤灶有相当数量的淋巴细胞浸润，对照组未见淋巴细胞浸润。流式细胞术显示，在损伤脑组织中，实验组的CD4+淋巴细胞数/总细胞数比率为13.28%±1.60%，对照组为0.41%±0.12%，P<0.01)；实验组的CD8+淋巴细胞/总细胞数比率为5.11%±1.03%，对照组为0.57%±0.26%，P<0.01)。结论神经干细胞具有一定免疫原性，当移植到外伤性脑损伤病灶中时，可以诱发局部淋巴细胞浸润。
【关键词】外伤性脑损伤；神经干细胞；移植；淋巴细胞
神经干细胞具有多分化潜能，并且可以在体外大量增殖，是修复受损神经组织的理想细胞来源，在神经组织重建方面有良好的应用前景。重度颅脑损伤导致严重的神经组织坏死，病死率高，幸存者也往往存在不同程度的后遗症。通过移植神经干细胞，修复损伤坏死的脑组织，将是降低颅脑损伤致残率的有效途径。但是神经干细胞移植的免疫应答方面的研究尚未深入开展。笔者在神经干细胞移植治疗重度颅脑损伤的研究中观察到小圆形单个核细胞在移植部位聚集的现象，因此进一步设计本实验，以探讨在外伤性脑损伤的条件下，移植同种神经干细胞是否诱发淋巴细胞浸润。
1材料与方法
1.1试剂和作物
DMEM/F12培养基、EGF、bFGF、B27添加剂、胰蛋白酶均购于Gibco公司。一次性塑料培养瓶为Orange公司产品。抗神经上皮干细胞蛋白(Nestin)单克隆抗体购于晶美生物公司。FITC抗RTla单克隆抗体购自Pharmingen公司。FITC抗CD4抗体、RPE抗CD8抗体购于联科公司 ......
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