贝那普利及依贝沙坦对大鼠心肌纤维化的作用(2)
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心肌组织总RNA提取按照Trizol试剂盒说明书(GIBCO，BRL公司，美国)，RT-PCR扩增条件，引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。按照一步法RT-PCR试剂盒(大连宝生物工程有限公司)提供的说明书加入RT-PCR反应所需试剂、引物、RNA样品，Taq酶、无RNA酶无菌水至终体积50μl，逆转录条件为：50℃1 h；PCR条件为94℃预变性3 min，94℃变性45 S，退火45 s，72℃延伸2 min。以β-actin为内参照，每次PCR反应至少重复3次。取5μl PCR产物，于2%琼脂糖凝胶电泳后经计算机凝胶图像分析系统(Bio-Rad公司，美国)对PCR产物进行定量分析，以与β-actin相对值记录结果。
1.6 TGFβ1、CTGF、PAl-1蛋白水平表达
冰冻组织加入液氮研磨 ......
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