β1受体反义基因对肾性高血压大鼠心脏β受体的影响(1)
【摘要】目的 观察阳离子脂质体混合物与β1受体反义寡核苷酸(β1-AS-ODN)单次注射对两肾一夹肾性高血压大鼠血压及心脏β受体mRNA、受体密度的影响。方法 用SD大鼠制作两肾一夹肾性高血压模型，将动物随机分为5组，每组18只：β1-AS-ODN组，β1-IN-ODN组，2K1C组，假手术组，SD组。于术后第4周经鼠尾静脉注射阳离子脂质体/β1-ODN的混合物(摩尔比2.0)，注射剂量为0.5 mg·kg-1，Tail-cuff法检测血压，半定量RT-PCR测定β1mRNA水平，放射免疫法测定受体密度，Western blot测定蛋白水平。数据采用one-way ANOVA分析，两两比较用Newman-Keuls法。结果 与2K1C组相比，β1-AS-ODN可使血压下降维持4周(P[1-2]。影响基因治疗主要因素在于没有安全、有效的转导系统，而阳离子脂质体是最有前途的非病毒载体之一[3]。本研究小组已经报道阳离子脂质体介导的针对β1受体的反义基因治疗对两肾一夹(2K1C)高血压大鼠有很好的降压效果[4-5]。本实验采用2K1C高血压大鼠模型，研究阳离子脂质体混合物(DOTAP/DOPE)介导的β1受体反义基因治疗对2K1C高血压大鼠心脏β受体mRNA、蛋白的影响，探讨β1受体反义寡核苷酸降低血压的机制。
1 材料与方法
1.1 试剂
反义寡核苷酸(β1-AS-ODN)、反向寡核苷酸(β1-IN-ODN)由上海生工公司合成，骨架硫代磷酸化修饰。阳离子脂质体(DOTAP/cholesterol Qbiogene)和辅助脂质体 (DOPE，Sigma)；Tail-cuff大鼠血压测定仪，中日友好医院心血管病研究所；Trizol(Invitrogen)；RT试剂盒(MBI)和PCR试剂盒(MBI)。, http://www.100md.com(梁远红 林曙光 周 燕 王晋明 王 芳 余细勇)
1 材料与方法
1.1 试剂
反义寡核苷酸(β1-AS-ODN)、反向寡核苷酸(β1-IN-ODN)由上海生工公司合成，骨架硫代磷酸化修饰。阳离子脂质体(DOTAP/cholesterol Qbiogene)和辅助脂质体 (DOPE，Sigma)；Tail-cuff大鼠血压测定仪，中日友好医院心血管病研究所；Trizol(Invitrogen)；RT试剂盒(MBI)和PCR试剂盒(MBI)。, http://www.100md.com(梁远红 林曙光 周 燕 王晋明 王 芳 余细勇)