脂多糖对AR42J细胞核因子-KB、肿瘤坏死因子-α表达的影响
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[摘要]目的探讨NF-kB在急性胰腺炎(AP)发病过程中对TNF-a基因的转录调节作用。以便有助于从基因转录调节的水平寻找AP治疗的新靶点。方法以10mg/L脂多糖刺激AR42J细胞构建急性胰腺炎的体外模型，设2 h、6 h、12 h、18 h和24h共5个时间点，每时间点设3个复孔。逆转录一多聚酶链反应(RT-PcR)半定量法观察肿瘤坏死因子(TNF-a)/p65亚单位mRNA表达的变化；ELISA法检测TSF-gt在细胞上清中质量浓度的变化；链酶亲和素一生物素-过氧化物酶复合物法(SABc)检测p65蛋白在AR42J细胞中的表达。人工碘比色法观察培养液上清中淀粉酶的活性改变。结果脂多糖刺激后，AR42J细胞以时间依赖方式上调TNF-a和p65mRNA的表达，并伴随TNF-a蛋白的表达增加；TNF-α；t与p65表达具有直线相关性(P0.05)。结论在脂多糖诱导的胰腺腺泡细胞AR42J炎性效应中，NF-kB表达且活性增强，调控着致炎细胞因子TNF-a的表达。
[关键词]脂多糖；急性胰腺炎；转录因子；腺泡细胞
急性胰腺炎(acute pancreatitis，AP)是常见的危重疾病之一，病死率高，虽然大部分患者病情较轻为轻型，呈自限性，但约有20%～30%为重症患者，其中约有10%～30%的患者死于各种并发症。因而阐明AP病理生理过程及寻找有效的治疗方法意义重大。研究表明，核因子-kB在AP发病的早期即被激活，并调节多种细胞因子的基因转录，其中肿瘤坏死因子.a(TNF-a)起着关键性的作用，已成为评价AP病情的指标之一。脂多糖(lipoplysaceharide，LPS)已证实它参与AP的发病和病理生理过程，并且与AP的严重程度和并发症相关，可作为判断AP预后的一个因素。本文旨在通过LPS刺激大鼠胰腺腺泡AR42J细胞，研究NF-出在AP发病过程中对TNF-a基因的转录调节作用，有助于从基因转录调节的水平寻找AP治疗的新靶点。
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