机械拉伸对γ-干扰素诱导肺泡上皮细胞人β-防御素-3表达的影响
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[摘要]目的 研究机械拉伸对γ-干扰素(IFNγ-)诱导肺泡上皮细胞(A549细胞)人β-防御素-3(HBD-3)表达的影响并探讨HBD-3在呼吸机相关性肺炎(VAP)发病机制中的作用。方法 体外培养A549细胞，分别给予机械拉伸(S组)，10ng/ml IFN-γ(I组)和10ng/ml IFN-γ+机械拉伸(IS组)3种处理，未处理的细胞为对照组(C组)，处理的时间为2h、4h和6h。拉伸由细胞Flexercell-4000TTM拉伸系统提供，拉伸的幅度为20%，速率为30次/min。处理后实时定量逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测HBD-3 mRNA的表达；处理6h的细胞继续培养至24h，激光扫描共聚焦显微镜检测HBD-3的表达。采用单因素方差分析和g检验对实验数据进行统计学分析。结果单独的机械拉伸不能使HBD-3mRNA的表达发生显著变化。10ng/ml IFN-γ处理2h、4h和6h后，HBD-3 mRNA表达量较之C组分别增加了(2.63±0.60)，(8.02±1.63)和(12.21±2.35)倍。10ng/ml IFN-γ+机械拉伸处理2h、4h和6h后，HBD-3 mRNA表达量较之C组分别增加了(1.54±0.16)，(4.37±0.87)和(6.99±1.32)倍，但均显著低于I组(P<0.01)。6h机械拉伸后，IS组HBD-3的表达显著少于I组(P<0.01)，同C组差异无统计学意义。结论 机械拉伸能显著抑制IFN-γ诱导肺泡上皮细胞HBD-3表达的上调，这可能是机械通气(MV)的患者易于发生VAP的原因之一。
[关键词]机械拉伸；γ-干扰素；肺泡上皮细胞；β-防御素
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