谷氨酰胺对白细胞介素-1β刺激下大鼠肝细胞一氧化氮的产生及线粒体膜电位的影响
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[摘要]目的 利用原代培养的大鼠肝细胞,观察不同浓度的谷氨酰胺(Glutamine,Gin)在体外对白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)刺激下肝细胞一氧化氮(Nitric oxide NO)过度产生和线粒体膜电位降低的影响。方法 选用6周龄SD大鼠,采用原位胶原酶循环灌注消化法获取高纯度原代大鼠肝细胞,培养48h后分别用生理盐水、IL-1β(1nmol/L)以及IL-1β(1nmol/L)联合不同浓度的Gin(2mmol/L、5mmoL/L、10mmol/L)刺激肝细胞24h,留取细胞和上清液,采用生化法测定上清液丙氨酸转移酶(alanine aminotrarlsferase,ALT)和NO的水平,采用荧光探针JC-1结合流式细胞仪检測肝细胞线粒体膜电位的变化。对各组数据之间进行方差分析。明确是否具有统计学意义。
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