胰岛素对烧伤血清诱导血管内皮细胞凋亡的影响及机制
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[摘要]目的 探讨胰岛素对烧伤血清诱导血管内皮细胞凋亡的影响及相关机制。方法 体外常规培养内皮细胞系ECV304，随机分为正常对照组(n=6)，体积分数15%(V/V)正常大鼠血清培养；烧伤血清刺激组(n=6)，体积分数15%(V/V)自制烧伤大鼠血清培养，血清采自背部30%TBSA皿，烫伤大鼠模型；胰岛素处理组(n=6)，体积分数15%(V/V)自制烧伤大鼠血清中加入10-7M/L胰岛素培养；刺激6h后采用原位末端标记法(TUNEL)观察内皮细胞凋亡、免疫组织化学染色和蛋白印迹法检测抗凋亡蛋白bcl-2及eNOS的蛋白表达变化，数据以表示，均数比较采用单因素方差分析，以P<0.05为差异具有统计学意义。结果 与正常对照组比较，烧伤血清促进内皮细胞凋亡(18.5%±3.1%)，免疫组化染色bei-2平均吸光度低(0.14±0.02)，蛋白印迹实验显示bcI-2(0.36±0.12)和p-eNOS(0.55±0.28)表达降低(P<0.01)。相对于烧伤血清刺激组，胰岛素处理组细胞凋亡显著减少(9.6±2.8%)，免疫组化染色bel-2平均吸光度升高(0.21±0.03)，蛋白印迹实验显示bel-2(0.94±0.25)和p-eNOS(0.89±0.16)表达明显恢复(p<0.01)。eNOS在各组中无明显变化。结论胰岛素明显抑制烧伤血清诱导下的内皮细胞凋亡并增加抗凋亡蛋白bel-2的表达，此作用可能与eNOS的磷酸化有关。
[关键词]胰岛素；烧伤；内皮细胞；凋亡；内皮型一氧化氮合酸
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