心肺复苏大鼠海马神经元磷脂酰肌醇-3-激酶、蛋白激酶B和磷酸化CAMP应答元件结合蛋白表达的变化及A
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[摘要]目的 探讨心肺复苏后大鼠海马神经元磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinositide 3-kinase， PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B，PKB)、磷酸化cAMP应答元件结合蛋白(phosphorylation of cAMP re-sponse element bindillg protein，p-CREB)表达的变化，以及APPl7肽对它们的影响。方法实验地点在宣武医院神经变性病学重点实验室。雄性Wistar大鼠21只，随机分3组，每组7只：假手术对照组(A组)、心肺复苏组(B组)、心肺复苏+APPl7肽组(C组)。自主呼吸循环恢复(return 0f spontaneous cir-culation，ROSC)标准为心电图出现正常的QRS波群，心室内压≥60mmHg，持续10min以上；夹闭气管制作大鼠心跳呼吸停止模型，行心肺复苏。当大鼠出现ROSC时，复苏组静脉注射生理盐水；APP17肽组静脉注射APP17肽10μg(300g)-1。对照组行假手术，静脉注射生理盐水。维持生命体征至2h，断头取脑，行冰冻切片。应用免疫组化法观察3组大鼠复苏2h后海马神经元P13K，PKB，p-CREB表达情况；三组中各取1只大鼠于ROSC后2h，分离海马；应用Western-blot方法测定海马神经元PK3，p-CREB蛋白含量。数据以均数±标准差(x±s)表示，组间数据用方差分析，以P<0.05为差异具有统计学意义。结果免疫组化法显示：B组P13K阳性细胞表达为(2.75±1.80)，略高于A组(2.53±1.53)，差异没有统计学意义；而C组为(5.85±2.83)，较B组增加，差异具有统计学意义(P<0.01)。B组PKB和p-CREB阳性细胞分别较A组明显减少[(2.45±1.36)vs.(5.22±2.50)，(p<0.05)；(2.41±1.11)vs·(8.31±3.02)，P<0.01]；C组PKB和p-CREB阳性细胞分别较B组增高[(9.66±4.32)vs.(2.45±1.36)，P<0.01；(14.18±3.96)vs.(2.41±1.11)，P<0.01]。Western-blot法测定PKB，p-CREB蛋白含量B组较A组明显减少；C组较B组明显增加。结论心肺复苏大鼠ROSC 2h海马神经元PKB，p-CREB表达降低，APP17肽能恢复神经元P13K，PKB，p-CREB的表达，对心肺复苏后海马神经元损伤有保护作用。
[关键词]心肺复苏；磷脂酰肌醇-3-激酶；蛋白激酶B；磷酸化cAMP应答元件结合蛋白；APP17肽
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