脑源性神经营养因子预处理对沙土鼠脑缺血-再灌注损伤的影响
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[摘要]目的探讨脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)预处理对沙土鼠脑缺血一再灌注(ischemia-repeffusion，I/R)后神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法蒙古种沙土鼠48只，随机分为6组，每组各8只：正常对照组(C)；缺血一再灌注组(I/R)，全脑缺血20min后再灌注24h；BDNF预处理6，12，24，48h组(PR6，PR12，PR24，PR48)，PR6，PR12，PR24，PR48各组分别于脑缺血前6，12，24，48h经侧脑室注射BDNF(0.5μg/只)进行预处理，缺血20min后分别再灌注24h。实验地点在贵阳医学院动物实验中心。采用夹闭沙土鼠双侧颈总动脉20min后去除动脉夹使血流再通的方法制作全脑I/R损伤模型，夹闭过程中出现瞳孔散大、对光反射消失及翻正反射消失等则说明产生全脑缺血。除C组外的所有动物分别于脑缺血20min再灌注24h结束时断头取脑，取视交叉后Ⅰ-4 mm处的额叶皮层组织制备石蜡切片，TUNEL法检测脑皮层凋亡神经细胞，免疫组化法检测Bcl-2，Bax蛋白的表达。统计分析采用方差分析法。结果C组未检测到凋亡细胞及Bcl-2，Bax蛋白阳性表达细胞；I/R组及BDNF预处理各组沙土鼠脑皮层均可检测到凋亡细胞，且BDNF预处理各组细胞凋亡指数均明显低于I/R组，P值均为0.000；与I/R组比较，BDNF预处理各组脑皮层Bcl-2蛋白阳性细胞指数均显著增高，而Bax蛋白的阳性细胞指数均显著降低，P值均为0.000；BDNF预处理各组中以6，12h预处理组的细胞凋亡指数及Bax蛋白阳性细胞指数较低，P值分别为0.056和0.001，而Bcl-2蛋白阳性细胞指数较高，P值为O，005。结论不同时间窗的BDNF预处理均能不同程度的减轻脑I/R后神经细胞凋亡，有明显脑保护作用，以脑I/R损伤前6，12h时间窗内给予BDNF预处理的脑保护效果较明显；其机制可能是通过上调Bcl-2蛋白的表达及抑制Bax蛋白的表达而实现。
[关键词]脑缺血；再灌注；脑源性神经营养因子；细胞凋亡；凋亡相关基因
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