血必净注射液对脂多糖刺激大鼠调节性T细胞凋亡及其介导效应T细胞免疫功能的影响
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[摘要]目的探讨中药血必净注射液对体外脂多糖(LPS)刺激CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)凋亡及其介导效应T细胞(Teff)增殖反应、分泌白细胞介素-2(IL-2)功能的影响。方法40只雄性清洁级Wistar大鼠，实验前禁食12h。免疫磁珠法分选大鼠脾脏CD4+CD25+Treg，分为对照组(n=8)、抗CD3/CD28组(n=8)、抗CD3/CD28+LPS组(n=8)、抗CD3/CD28+血必净组(n=8)和抗CD3/CD28+LPS+血必净组(n=8)。培养3d后流式细胞术检测CD4+CD25+Treg凋亡率、叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)和T淋巴细胞毒性相关抗原4(CILA-4)表达，酶联免疫吸附试验检测IL-10分泌。同时，CD4+CD25+Treg与CD4+CD25-T细胞1:1培养，刀豆素A刺激68h后分析Treg对Teff增殖的抑制效应，并检测上清中IL-2/可溶性IL-2受体水平。结果抗CD3/CD28诱导Treg凋亡率为(33.70±3.06%)，显著高于对照组(12.84±0.84)%；抗CD3/CD28+LPS+血必净组(45.13±2.70)%凋亡率明显高于抗CD3/CD28+LPS组[(29.41±1.63)%，P<0.01]。同时，CD4+CD25+Treg Foxp3和CTLA-4表达及IL-10分泌随凋亡增加而降低。抗CD3/CD28+血必净组(31.26%)Teff增殖反应平均抑制率显著低于对照组(54.48%，P<0.05)，抗CD3/CD28+LPS+血必净组抑制率与抗CD3/CD28+LPS组比较亦明显下降(P<0.01)。此外，抗CD3/CD28+血必净组和抗CD3/CD28+LPS+血必净组IL-2分泌水平均显著高于抗CD3/CD28+LPS组(P<0.01)。结论LPS刺激可明显上调大鼠Treg对Teff的抑制功能，血必净注射液能通过促进Treg凋亡而有效改善其对Teff的抑制效应。
[关键词]脓毒症；调节性T细胞；效应T细胞；凋亡；血必净注射液
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