脑外伤后抑郁状态模型的建立及效果评价(3)
1.5 高效液相色谱荧光检测法测定大鼠脑组织中3种神经递质的含量测定大鼠脑组织中3种神经递质分别为多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT) 、 去甲肾上腺素(NE),测定步骤:①样品处理 实验结束进行行为学测评后,迅速断头取脑,在冰台器中迅速分离出海马、前额叶、下丘脑和纹状体,称重后放入玻璃组织匀浆器中,加入预冷的0.1%高氯酸425 μl 和25 μl 的对羟基苯甲酸二聚体(50 μg/ml),在冰浴下充分研磨使组织匀浆化后,将组织匀浆液倒入离心管内,置离心机内以(4 ℃) 12 000 r/min离心20 min,吸取上清液进样测定。②色谱条件 分析柱为C18反相色谱柱(250 mm× 4.6 mm)。流动相:A=甲醇、B=0.1 mol/L醋酸钠缓冲液(用浓盐酸调pH为5.0,经0.45 μm的微膜过滤并超声脱气后使用),A∶ B=1∶ 9,流速:1.0 ml/min;每次进样20 μl,柱温为室温(25 ℃)。荧光检测器波长设置:激发波长280 nm,发射波长315 nm,采用外标法定量。
1.6 海马脑组织形态学观察
大鼠处死后 ......
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