1.2 方法

    1.2.1 动物分组 将大鼠随机(随机数字法)分为3组，对照组10只：生理盐水5 ml腹腔注射；LPS组10只：腹腔注射LPS，10 mg/kg稀释至5 ml；乌司他丁LPS+UTI组10只：于注射LPS同时再次给予腹腔注射乌司他丁5万U /kg。于注射药物后24 h处死动物。LPS组注药后部分死亡，补足动物注射LPS，使进入统计动物达10只。

    1.2.2 肺病理学观察 取右中叶肺组织10%甲醛常规固定，乙醇梯度脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，切片厚度4 μm，HE染色，显微镜下观察。

    1.2.3 肺组织TLR4、TNF-α mRNA测定 用Trizol RNA 提取试剂盒对保存在液氮中的肺组织进行总RNA 抽提与纯化，然后反转录为cDNA。RT-PCR 按照试剂盒说明书进行操作，采用50 μl 反应体系。2.0%琼脂糖凝胶电泳，凝胶自动成像系统摄像并分析各条带A 值(基因表达值= 目的基因/ 内参照) 。以β-actin 为内参照。基因引物序列如下：TLR4sense：5’-CGCTTTCAGCTTTGCCTTCA

    TTAC-3 ......