脓毒症大鼠肺组织抑制因子—1表达变化(3)
1.5 肺组织病理形态检查
切片行苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察肺组织病理变化。
1.6 肺组织中炎症细胞的免疫组化染色
切片脱蜡水化,采用免疫组织化学SP法以白细胞特有的表面标志物CD18标记肺组织中炎症细胞。CD18兔抗大鼠多抗、兔SP免疫组化试剂盒及DAB显色试剂盒均由上海蓝基生物有限公司提供。切片经抗原修复液处理、血清封闭后加一抗2 μl,4 ℃过夜,PBS冲洗;加生物素化二抗,37 ℃,20 min,PBS冲洗;再滴加辣酶根标记链酶卵白素工作液,37 ℃,20 min,冲洗后DAB显色6 min,水洗;苏木素复染细胞核,中性树胶封固,阳性细胞为棕黄颗粒染色。显微图像分析系统选5个400倍视野的平均值,计算单位面积CD18阳性细胞数量以表示组织中炎症细胞浸润数。
1.7 统计学方法
数据采用SPSS 19.0软件包进行统计分析,各项指标用均数±标准差(x±s)表示,组间比较独立样本比较的t检验;TIMP-1、CD18阳性细胞数与PaO2/FiO2 ......
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