1 材料与方法

    1.1 实验动物与主要试剂

    雌性成年大鼠，鼠龄8周，60只，体质量200～250 g，由南方医科大学实验动物中心提供，动物合格证：0096502；雌性幼鼠，鼠龄4周，5只，体质量40～50 g，由广东省医学实验动物中心提供，动物合格证：0097319； L-精氨酸购于北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司；重组人粒细胞刺激因子注射液购于齐鲁制药有限公司；淀粉酶检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所；IL-6 ELISA试剂盒购于Neo Bioscience公司。

    1.2 方法

    1.2.1 MSC的分离培养及EDU标记 造模前1周，将雌性幼鼠脱臼处死，用75%酒精浸泡。无菌条件下分离股骨和肱骨，用DMEM培养基冲出骨髓，制备成单细胞悬液。取3代以后的MSC调整细胞质量浓度分别为1×10⁶个/ml和5×10⁶个/ml备用。将全部细胞进行EDU标记，使用4%多聚甲醛固定后，在0.5%Trion X-100的PBS中室温孵育，再加入1×Apollo工作液避光进行孵育，DAPI染核后荧光淬灭剂封片 ......