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编号:12691398
亚低温对大鼠脑出血后脑水肿及缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子表达的影响(3)
http://www.100md.com 2013年5月1日 中华急诊医学杂志 2013年第5期
     1.8 Westernblot 检测HIF1α、VEGF蛋白表达

    将冻于液氮中的小块血肿周围组织研磨成粉末状,放入匀浆器,加入组织蛋白液抽提液,匀浆10 min,置于冰上30 min,4℃离心收集上清液,BCA法蛋白定量。每道30 μg蛋白质上样,95℃变性5 min。在10%SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳后,电转移至硝酸纤维膜上,依相对分子质量大小切取条带,加入封闭液室温下振荡2 h,依次滴加HIF1α多克隆抗体(1∶500),VEGF165多克隆抗体(1∶500),4℃过夜。加入辣根过氧化物酶标记的二抗,室温孵育1 h,DAB显色。以βactin为内参抗体,采用凝胶图像处理系统分析目标带,计算整合灰度值的相对百分比。

    1.9 统计学方法

    应用SPSS 13.0统计软件进行统计学处理。所得实验数据用均数±标准差(x±s)表示,各组实验结果方差齐性,应用单因素方差分析(OneWay ANOVA),组间两两比较采用SNKq检验,以P<0.05为差异具有统计学意义。

    2 结果

    2.1 脑组织含水量变化

    (1)出血灶同侧 与sham组比较 ......
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