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编号:12688585
间充质干细胞移植减轻大鼠盐酸吸入性肺损伤(3)
http://www.100md.com 2013年6月1日 中华急诊医学杂志 2013年第6期
     干细胞迁移实验:分2组,分别为对照组(正常肺细胞)和损伤组(盐酸损伤肺细胞),每组3个孔,各取上述600 μl肺细胞悬液接种于24孔板的下层,同时于Transwell体系的小室(8 μm膜孔径)内接种100 μl干细胞悬液(密度:5×105/ml)。36 h后取出培养小室,棉签擦去小室内膜细胞,4%中性甲醛固定,吉姆萨染色,光镜下观察迁移的干细胞并拍照,每个小室于镜下随机挑选2个高倍视野(×200)计数迁移细胞数量。实验重复3次。

    细胞因子质量浓度检测:分为4组,正常组(正常肺细胞单独培养);损伤组(损伤肺细胞单独培养);共培养组(损伤肺细胞和干细胞混合共培养);Transwell组(使用Transwell体系进行损伤肺细胞和干细胞的共培养,Transwell小室孔径为0.4 μm)。6 h后,取上清液-80 ℃冻存待测。

    1.5 TNF-α 、IL-6和IL-10检测

    用ELISA试剂盒检测血清、BALF和共培养上清液的肿瘤坏死因子-α(TNF-α) 、白介素-6(IL-6)和白介素-10(IL-10)质量浓度 ......
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