促红细胞生成素对缺氧/复氧心肌骨架蛋白的作用(3)
2.2 免疫荧光法心肌细胞鉴定在荧光显微镜下呈红染的为心肌细胞,计数达94%以上,提示分离细胞经差速贴壁和5-Brdu抑制非心肌细胞增值后,可以获得较纯心肌细胞,见图4。
2.3 培养心肌细胞的骨架蛋白(微管蛋白和肌动蛋白)免疫荧光染色结果
正常培养心肌细胞荧光双染见微管蛋白绿染,高倍镜下呈丝状由细胞核向周围放射/网格状分布形成心肌细胞骨架结构,结构清晰、荧光强;缺氧/复氧后微管蛋白结构模糊、支架结构不完整、断裂,荧光强度明显减弱。正常培养心肌细胞荧光染色可见肌动蛋白红染,呈丝状由细胞核向周围放射/网格状分布形成心肌细胞骨架结构,结构清晰、荧光强;H/R氧组心肌细胞肌动蛋白、微管蛋白荧光染色结构明显破坏,网状结构模糊不清,平均荧光强度值较C组明显减弱,但与EPO组 比较差异均无统计学意义,见图5、6。
3 讨论
研究发现窒息8 min后复苏大鼠的心肌存在着收缩和舒张功能的不全,与其他研究结果一致[5],同时发现 EPO可以部分改善这种缺血-再灌注后的心功能不全 ......
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