G蛋白偶联受体56参与轴突发育和髓鞘化(3)
1.2.5 电镜 出生后28 dGpr56+/-和Gpr56-/-小鼠各3只用2%福尔马林+3%戊二醛溶液灌流固定后,取大脑胼胝体制成1 mm3组织块。用震荡切片机将组织块切成80~100 μm的切片。0.1M磷酸盐缓冲液漂洗后,用1%四氧化锇后固定2 h,脱水、树脂包埋。切超薄切片,在Philips CM 120电镜(FEI Company, Hillsboro, Oregon, USA)下观察。从每只动物胼胝体近中侧取四个非重叠视野,拍不同倍数的照片。用Image J software (SummaSketch Ⅲ Summagraphics, Seattle, WA)测量每个神经纤维轴突和总神经纤维(轴突+髓鞘)的直径。用公式g-ratio=神经纤维轴突直径/总神经纤维(轴突+髓鞘)的直径计算g-ratio值。这个公式等同于神经纤维轴突横截面积除以总神经纤维的横截面积。比较Gpr56+/-和Gpr56-/-小鼠神经纤维直径的大小。研究者采取盲法测量Gpr56+/-和Gpr56-/-组g-ratio值 ......
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