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编号:12618254
2的表达> 脂氧素抑制内毒素诱导大鼠原代肺成纤维细胞环氧合酶—2及前列腺素E2的表达(3)
http://www.100md.com 2015年3月1日 中华急诊医学杂志 2015年第3期
     1.2.4 实验分组 实验分三大组: (1)正常对照组:不给予任何处理;(2)LPS处理组:不同时间点(3、6、9 h)给予不同质量浓度LPS(0.1、1.0、10 μg/mL);(3)脂氧素LPS组:给予不同浓度(0 nmol/mL、100 nmol/mL)脂氧素加上LPS(1 μg/mL)刺激6 h。药物刺激前均无血清DMEM培养基培养24 h。

    1.2.5 经典细胞增殖/毒性检测试验(MTT) MTT[8]法实验步骤:将分离纯化的LF用含15%NBS得培养液配成单个细胞悬液,接种入6孔板,2 mL/孔,37 ℃5%CO2培养箱培养,待细胞80%~90%呈融合状态时,换无血清培养基培养24 h后重悬,调整密度为1×106个/mL,加入96孔板,100 μL/孔,5复孔,同时设空白对照孔(不加细胞),加入不同质量浓度LPS作为刺激物,建立体外炎症模型,同时以PBS作为阴性对照。药物干预时间设三个,分别为3、6、9 h,至规定时间后加入MTT试剂 ......
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