RON基因反义核酸真核表达载体的构建及其对A549的体外作用
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[摘 要]
目的 肺癌的发生是多因素作用的结果，RON基因参与其中，但它在肺癌的基因治疗中意义尚不明确：本研究旨在探讨RON能否作为肺癌的基因治疗靶点及针对该基因跨膜区段(RONm)反义核酸对肺癌细胞的生物学功能的影响。方法 从人肺鳞癌细胞提取总RNA进行RT—PCR、T载体克隆和测序，获得RON基因的跨膜区段，并将其反向插入真核表达载体中，转染肺癌细胞，利用ELISA检测细胞模型RON基因表达后的蛋白水平，同时利用MTF和细胞记数方法监测细胞的生物学活性的变化。结果 用RT-PCR亚克隆RONm，测序结果与GenBank (X70040)一致。构建的RONm反义真核表达载体，转染后的肺癌细胞株A549 RON基因表达量和细胞活性明显降低：结论 成功构建RONm反义核酸真核表达载体，RON能作为肺癌的基因治疗靶点；RONm反义核酸町有效抑制 RON基因的表达阳性肺癌细胞的生长，为进一步研究将RONm反义核酸作为一种的肺癌基因治疗方法打下了分子生物学基础。 [关键词] RON基因；受体酪氨酸激酶；核酸类，反义；肺癌A549；抑制
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