刘志涛, 张 萍, 何国祥, 刘建平

    (第三军医大学西南医院心血管内科, 重庆 400038)

    经皮冠状动脉介入(percutaneous coronary intervention, PCI)治疗术对动脉的损伤会引起一系列的变化, 导致靶病变处血管新生内膜形成及增生,造成再狭窄(restenosis, RS)。血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)的增殖和迁移是 RS 的主要病理机制[1]。组织损伤后伤口及其附近上皮存在的损伤电流场源是一种稳恒直流电场,部分离体实验也发现, 外加电场可以影响内皮细胞和VSMCs的增殖、迁移以及细胞的排列[2]。本研究探讨外加稳恒直流电场对兔腹主动脉球囊损伤后新生内膜增生的影响及其意义。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及分组

    健康日本大耳白兔 65只, 雌雄不限, 体质量(1.98±0.23)kg, 由第三军医大学实验动物中心提供。动物实验依照第三军医大学动物实验委员会许可的协议进行。随机分为正常对照组(n=5)、假手术组(n=24)及实验组(n=36)。假手术组与实验组手术过程完全相同, 也埋置电极但不给予电场刺激。假手术组及实验组分别观察至术后1天、1周、2周以及4周, 实验组根据施加电场强度不同分为3.0V/cm和4.0V/cm两个亚组, 术后第2天开始电治疗。

    1.2 主要试剂、材料和仪器

    HE染色; 天狼猩红购自海泛柯生物科技有限公司; 鼠抗兔Ⅰ型胶原单克隆抗体购自 Abcam 公司; 鼠抗兔Ⅲ型胶原单克隆抗体购自 Calbiochem公司; GAPDH(V-18)购自Santa Cruz公司; WYJ数字显示高精度直流稳压电源购自上海山杰科技有限公司; Western blot凝胶成像系统购自Bio-Rad公司; 显微镜下图像应用 Olympus BX51显微图像采集系统采集; 图像分析均使用Image Pro Plus 6.0图像分析软件; Western blot结果分析使用 Quangtity One软件。自制铂电极(电极直径0.40 mm, 长20 mm,导线长约30 cm)。

    1.3 动物模型构建

    兔经耳缘静脉注射3%戊巴比妥1ml/kg麻醉。分离兔右侧股动脉约 2～3cm 长, 纵向逐层切开下腹壁暴露腹腔, 显示腹主动脉下段与髂总动脉分叉处。从股动脉插入带有PTCA导丝支持的2.5 mm×20.0 mm PTCA球囊, 推送至腹主动脉下段, 使球囊头端距离腹主动脉分叉处5.0 cm ......