膜性肾病患者肾组织肥大细胞的分布及病理意义
小管,皮质,1对象与方法,1病例选择及相关病理资料的获取,2肾组织肥大细胞检测和定量计数方法,3免疫组化染色方法,4小管间质相对体积测量方法,5统计学处理,2结果,1肥大细胞在膜性肾病患者肾组织中的分布定位,2不同病
郑敬民,尹 广,刘志红(南京军区南京总医院全军肾脏病研究所国家肾脏疾病临床医学研究中心,南京 210002)
膜性肾病是导致成人肾病综合征的一个常见原因。在我国,膜性肾病约占原发性肾小球肾炎的10%[1]。在西方,膜性肾病的比例则高达30%[2]。但有关膜性肾病的病理机制仍不是很清楚。
近年来,有关肥大细胞在各种肾脏疾病发生发展中的可能作用引起了不少研究者的关注。包括膜性肾病在内的各种主要肾脏病患者肾组织中,均存在肥大细胞增多的现象[3?9]。但目前对肾组织肥大细胞的确切病理意义仍不了解。从已有的文献来看,针对特定肾脏疾病肾组织肥大细胞的研究仍然不多,病例数也很有限,尤其是在国内,这方面的文献更少(就我们查阅的文献来看,尚未见国内有相关报道)。就膜性肾病而言,国外文献只笼统地报道了患者肾组织肥大细胞增多的现象,尚未见对不同病理类型膜性肾病患者肾组织肥大细胞的分类比较分析。本文对包括Ⅰ~Ⅳ期在内的不同病理类型膜性肾病患者肾组织中的肥大细胞及其与某些临床病理指标的相关性进行了定量分析,以比较全面地了解我国患者(汉族人)肾组织肥大细胞的分布特点,探讨肥大细胞在膜性肾病发生发展中的可能病理意义。
1 对象与方法
1.1 病例选择及相关病理资料的获取
从南京军区南京总医院全军肾脏病研究所肾活检组织标本库中选取临床和病理资料完整的特发性膜性肾病病例55例(Ⅰ~Ⅳ期分别为5例、26例、16例和8例)。所有病例的肾活检组织均经光镜、免疫荧光和电镜分析,符合有关特发性膜性肾病的诊断标准[10]。同时选取8例移植供肾组织标本作为正常对照,所选供肾组织病理分析均显示无明显病变。所有临床相关资料(包括生化检测结果等)从有关病历资料库中获取。本文所有研究均遵守《赫尔辛基宣言》原则,并获得本单位伦理委员会的批准。
1.2 肾组织肥大细胞检测和定量计数方法
根据肾组织肥大细胞特异性高表达C3aR的特点[11,12],以免疫组化的方法标记肾组织中的肥大细胞。光镜下摄取皮质区图像,计录每张切片肾组织皮质区中的肥大细胞数;同时利用NIS Element BR软件测量每张切片皮质区的肾组织面积;得到每平方毫米肾组织(皮质区)肥大细胞平均数(肥大细胞密度)。
1.3 免疫组化染色方法
肾活检组织石蜡切片经常规脱蜡和复水处理后,于高压锅中高压进行抗原修复;以3%过氧化氢甲醇溶液灭活内源性过氧化物酶;以10%胎牛血清封阻30min;经磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline ......
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