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编号:385301
血小板衍生生长因子?C对体外培养血管内皮细胞及间充质干细胞的影响
http://www.100md.com 2015年4月21日 中华老年多器官疾病杂志 2015年第8期
1材料与方法,1试剂,2仪器,3细胞培养,4MTT法检测细胞增殖,5流式细胞仪检测细胞周期,6细胞划痕实验,7Transwell细胞迁移实验,8统计学处理,2结果,1细胞形态及鉴定,2PDGF-
     王子婧,钱智勇,郭希民,高德伟

    血小板衍生生长因子?C对体外培养血管内皮细胞及间充质干细胞的影响

    王子婧,钱智勇,郭希民,高德伟*

    (解放军总医院南楼临床部综合外二科,北京 100853)

    观察血小板衍生生长因子?C(PDGF-C)对体外培养的血管内皮细胞(VECs)及间充质干细胞(MSCs)的影响。采用培养的大鼠主动脉内皮细胞和MSCs,应用细胞直接计数法、噻唑蓝比色法(MTT法)评价细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,利用Transwell细胞迁移实验和细胞划痕实验测定细胞迁移能力。PDGF-C能明显刺激VECs和MSCs的增殖,增加两种细胞S期细胞的比例,对VECs增殖呈剂量依赖关系,对MSCs的促增殖作用在20μg/L达高峰。同时,PDGF-C促进VECs和MSCs的迁移能力,对MSCs迁移作用强于VECs。PDGF-C可促进培养的VECs、MSCs的增殖与迁移能力。

    大鼠;血小板衍生生长因子C;血管内皮细胞;间充质干细胞;细胞增殖;迁移

    血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)是血管内循环血液与中层平滑肌细胞之间的机械屏障,维持机体重要的生理功能。内皮细胞损伤后脱落,胶原及组织因子暴露,是形成动静脉血栓的重要始动因素。因此,血管内皮损伤后修复可作为血栓性疾病治疗的方法之一。其修复原理主要包括两方面:一是增强成熟内皮细胞的增殖和分化能力,加速内皮的自身修复;二是动员间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)归巢到损伤部位,内皮化后替代修复[1]。血小板衍生生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)是正常组织生长和维持的重要生长因子,包括至少PDGF-A,B,C,D 4个成员,其中PDGF-A和B的研究已较成熟,而PDGF-C则是新发现成员之一。研究表明PDGF-C有较强的促进血管新生能力[2.3],其所具有的多重生物学效应是血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)等其他生长因子所不具备的独特功能[4]。且PDGF-C参与了动脉损伤后修复的过程,机制是促血管平滑肌细胞凋亡或干预血管平滑肌细胞迁移[5],而对内皮细胞和干细胞的作用尚没有明确涉及。为此,我们利用PDGF-C对体外培养的主动脉内皮细胞和骨髓MSCs进行刺激,测定细胞增殖情况 ......

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