免疫磁珠法分离和纯化人胚胎神经干细胞
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关键词 神经干细胞；分离纯化；免疫磁珠
中图分类号 Q945.671
摘要 目的：建立有效的人类神经干细胞分离纯化系统和方法。方法：无菌取孕24周流产胎儿的室下区脑组织，制备细胞悬液，用磁性微珠标记的CDl33单克隆抗体与细胞孵育，通过磁分选器分离出CDl33(+)和CDl33(—)细胞，通过体外培养并诱导分化，观察CDl33阳性细胞和阴性细胞的增殖情况及分化能力。结果：经免疫磁珠分选的室下区脑组织中，CDl33(+)细胞占胚胎脑组织细胞的2%左右，该细胞体外扩增能力强，细胞呈球形生长，并易聚集成团，培养5 d、10 d、15 d、20 d进行活细胞计数，细胞增长率分别为1.79%、4.82%、7.21%、14.66%，诱导分化后的细胞经染色鉴定可分化为神经元、神经胶质等多种神经细胞；阴性细胞扩增能力弱，活细胞计数以死细胞数量居多，大约70%，另外一些细胞贴壁分化。结论：免疫磁珠法简便、有效，经免疫磁珠分离的神经干细胞在体外能进一步培养扩增并分化。
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