新生大鼠脑缺氧缺血后脑组织硝基酪氨酸测定
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关键词 硝基酪氨酸；缺氧；缺血；凋亡；脑
中图分类号 R722.1
摘要 目的：探讨缺氧缺血(H1)后脑组织硝基酪氨酸形成的时相与分布特征及其与细胞死亡的关系。方法：采用7 d龄Wistar大鼠42只制成HI脑损伤模型，分别于HI后30 mill、1 h、3 h、8 h、14 h、24 h、72 h处死6只，脑组织制作切片，取海马平面进行硝基酪氨酸和微管相关蛋白—2(MAP-2)免疫组化染色及硝基酪氨酸与发夹寡核苷酸探针(HPP)双染色，观察和计数皮层及僵核硝基酪氨酸阳性细胞数。以初生第7 d(P7)和第10 d(P10)的大鼠为对照。结果：硝基酪氨酸阳性细胞主要分布在HI侧MAP-2阴性区域，包括皮层、丘脑、纹状体、海马、皮层下白质、脑室卜区：在HI后早期，对照及对侧皮层血管内皮细胞及脑室F区也可偶见阳性细胞。在刚后30 min皮层及僵核硝基酪氨酸阳性细胞计数明显升高并在HI后3 h达到峰值，此后阳性细胞数逐渐下降；随时间的延长，阳性细胞逐渐缩小。荧光双染色结果显示，HI后早期硝基酪氨酸阳性细胞数明显高于HPP阳性细胞数，晚期则相反。结论：硝基酪氨酸形成与脑组织损伤密切相关，是反映细胞损伤的早期指标。
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