ＨＢｓＡｇ和Ｂ19 ＶＰ2复合抗原的基因克隆及在大肠杆菌中的表达
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关键词 B19 VP2；HBsAg；原核表达
中图分类号 R373
摘要 目的：构建乙肝表面抗原(HBsAg)—人微小病毒B19VP2蛋白的原核高效表达系统。方法：用PCR扩增HBsAz基因及B19病毒VP2基因，分别与PCEM—T重组，构建出pCEM-T-HBs及pCEM—T-VP2并测序分析；测序证实序列正确后，将PCEM-T-HBs中的HBs基因克隆入PCEX—5X—1表达载体中，得到pCEX—5X-1，HBs；再将pCEM—了—VP2中的VP2基因克隆人PCEX—5X-1-HBs中，得到pCEX—5X—1—HBs-VP2后转化至BL21(DE3)宿主菌中，并以IPTG诱导表达融合蛋白，以Wcstern-blot鉴定。结果：pCEX—5X-1—HBs-VP2可在大肠杆菌BL21中高效表达，表达产物经Western—blot鉴定具有HBsAg及B19 VP2的双重抗原性。结论：成功构建pGEX-5X-1—HBs—VPl原核表达载体，且其表达的重组蛋白具有良好的抗原性，为HBV和B19病毒重组多价疫苗的研究奠定了基础。
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