人微小病毒B19 VP2蛋白抗原在大肠杆菌中的表达
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关键词 人微小病毒B19;VP2抗原;表达
中图分类号 R373
摘要 目的:利用原核系统表达人微小病毒B19的重组蛋白抗原,为建立ELISA方法诊断B19病毒感染提供特异性抗原。方法:采用PCR方法扩增B19 vPl基因,将之插入到T载体中进行测序,验证序列正确后再重组入原核表达载体PET—30a(+),并转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,进行诱导表达。用SDS—PAGE分析表达产物。表达
—产物经亲合层析柱纯化得到VP2重组蛋白抗原。用B19 VPl 1sC对该蛋白进行了Western-B10t分析。结果:筛选出2株B19 VP2蛋白抗原高表达菌株,经IPTG诱导后,表达VP2重组蛋白量占菌体总蛋白量的24.6%。结论:VP2重组蛋白具有良好的抗原活性。
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