BALB/c小鼠小肠乳糖酶活性双糖酶法测定条件的优化
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关键词 乳糖酶;BALD/c小鼠;小肠
中图分类号 R151.4
摘要 目的:建立一种方便、准确测定小鼠小肠乳糖酶活性的方法。方法:采用不同pH的底物溶液与肠黏膜提取物反应,计算相应的酶活性;取不同反应时间(45 min,60 min,75 min),不同显色时间(45 min,60 min,75 min)和不同显色剂用量(2.0 ml,2.5 ml,3.0 ml)按L9,(34)正交实验设计方法,测定不同条件下的底物溶液与肠黏膜反应的A值作为正交实验的评分标准。结果与结论:由正交实验得出,该方法的最佳反应条件为:pH 4.6,水浴75min,显色时间45 min,显色剂用量3.0 m1;批内酶活性(0.029±0.003)U/ml,CV=2.49%,批间酶活性(0.032 ±0.004)U/ml,CV=4.19%。该方法具有很好的重复性和可靠性。
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