因表达载体的构建
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关键词 DF3/MUCl；转录调控序列；白喉毒素A链；克隆；重组质粒；乳癌
中图分类号 R737.9
摘要 目的：构建含人乳癌DF3/MuCl启动子转录调控序列和白喉毒素A链(DTA)基因的重组表达载体。方法：利用PCR技术从人乳癌细胞MCF—7十扩增出DF3/MUCl启动子的转录调控序列并克隆入PMDl8T载体中，再从pMDl8T-DF3重组质粒中切下DF3/MUCl启动子的转录调控序列并亚克隆人pCL3-Basic载体，构建重组质粒pCL3—DF3。从质粒pIBl30—DTA中切下DTA片断，以DTA基因替换重组质粒pCL3—DF3中的虫荧光素酶基因，构建重绍质粒pCL3—DF3—DTA。结果：构建了含人乳癌DF3/MUCl启动子转录调控序列和DTA的表达载体，酶切和测序结果与预期完全相符。结论：重组质粒pGL3—DF3—DTA构建成功。
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