人ＣＤ154基因真核表达载体的构建及在Ｅｃａ109细胞中的表达

http://www.100md.com 2005年8月1日 汤黎明 赵 勤 何 炜 朱 涵 王志举 张文豪 赵国强 董子

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     关键问 CDl54；真核表达载体；Ecal09细胞

    中图分类号 Q786

    摘要 目的：构建人CDl54基因真核表达质粒PcDNA3.1—CDl54，初步观察转染该质粒后Eca109细胞的细胞生物学特性。方法：人外周血单个核细胞体外经PHA激活后提取总RNA，用RT—PCR技术扩增人CDl54cDNA全长并构建真核表达质粒pcDNA3.1—CDl54。用Lipofectamine^TM2000介导pcDNA3.1-CD154质粒转染食管癌Eca109细胞株，RT—PCR检测转染细胞中CDl54 mRNA的表达，观察细胞生长特征。结果：用T7/SP6通用引物测序证实重组质粒中插入片段为正向插入的人cD154基因。PcDNA3.1—CD154转染Eca109细胞后细胞异型性明显改善，生长速率减慢。结论：pcDNA3.1—CD154构建成功；转染该质粒的Eca109细胞生物学特性发生改变。

    http://www.100md.com/html/paper/1671-6825/2005/04/01.htm

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