逆转录病毒载体介导的RNAi对MCF-7细胞E2F1 mRNA表达的影响
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关键词 逆转录病毒载体；RNAi；E2FI；抑制；MCF-7细胞
中图分类号 R730.59
摘要 目的：采用逆转录病毒载体介导的RNAi技术靶向抑制乳癌细胞MCF-7 E2F1 mRNA的表达。方法：构建重组的表达E2Fl1siRNA的逆转录病毒载体。将重组载体和空载体转染入MCF-7细胞中，共分9组：空载体组、未转染组和7个转染组。筛选出稳定转染的单克隆细胞扩大培养。应用RT-PCR方法检测转染细胞和未转染细胞 E2F1 mRNA的表达情况。结果：筛选出7个转染逆转录病毒载体的单克隆，命名为SIRI～7，其E2F1 mRNA表达量分别为0.857±0.015，0.850±0.037，0.907±0.029，0.878±0.021，0.900±0.021，0.912±0.031，0.913± 0.023；转染空载体和未转染的细胞E2F1 mRNA表达量分别为1.563 ±0.031和1.544±0.018；SIRl～7 E2F1 mR— NA表达量低于空载体及未转染组，差异有统计学意义(P0.05)。结论：逆转录病毒载体介导的RNAi技术特异、高效抑制靶基因的表达，为肿瘤基因治疗提供了新的思路和工具。
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