田七总皂甙对凝血酶诱导的兔血小板聚集的影响
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[摘要] 目的:探讨田七总皂甙对凝血酶诱导的兔血小板聚集的影响。方法:血小板悬液与田七总皂甙孵育5 min,然后用凝血酶(500 U·L-1)作用1 min,用NIKON TE2000E荧光倒置显微镜观察血小板聚集情况。结果:田七总皂甙对凝血酶诱导的兔血小板聚集有抑制作用,当田七总皂甙的浓度分别为50、100和200 μmol·L-1时,对血小板1 min聚集的抑制作用随浓度的加大而增强。结论:田七总皂甙具有抗血小板聚集的作用。
[关键词] 田七; 血小板聚集; 凝血酶; 兔
[中图分类号] R331.143 [文献标识码] A [文章编号] 1671-7562(2010)04-0337-03
doi:10.3969/j.issn.1671-7562.2010.04.003
Effects of Panpax notoginseng on aggregation of rabbit platelets
induced by thrombin
CHEN Xiaoping1, LIU Wen2, DING Hang2
(1. Department of Biology, Guangdong Medical College, Zhanjiang 524023, China; 2. Institute of Biochemistry and Molecular Biology, Guangdong Medical College, Zhanjiang 524023, China)
[Abstract] Objective: To study the effects of Panpax notoginseng on aggregation of rabbit platelets induced by thrombin. Methods: Suspensions of platelets were incubated withPanpax notoginseng for 5 min, and then were acted with thrombin (500 U·L-1) for 1 min. Platelet aggregation was analysed by inverted microscope(NIKON TE2000E). Results: Panpax notoginseng inhibited the platelet aggregation induced by thrombin (500 U·L-1) in a concentrationdependent manner(50,100 and 200 μmol·L-1). Conclusion: Panpax notoginseng has inhibitory effect on platelet aggregation.
[Key words] Panpax notoginseng; platelet aggregation; thrombin; rabbits
田七(Panpax notoginseng),又称参三七、田三七、山漆、金不换等等,为五加科草本植物,主要产于云南、广西,贵州、四川、江西等省也有栽种。田七具有化瘀止血、消肿定痛的功效。《本草纲目》中记载:田七“味甘微苦,性平,无毒。主治止血散血定痛”。为探讨田七是否对血小板聚集也起作用,我们采用体外血小板聚集法,利用凝血酶为诱导剂,用荧光倒置显微镜研究田七总皂甙对凝血酶诱导的兔血小板聚集的影响。结果报道如下。
1 材料和方法
1.1 动物
大白兔4只,雌雄兼用,体重(2.0±0.2) kg,由广东医学院动物中心提供。
1.2 药品和试剂
凝血酶、 N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙磺酸(Hepes)购自Sigma公司,其余为国产分析纯或生化纯试剂。
1.3 仪器
NIKON TE2000E荧光倒置显微镜,德国。
1.4 方法
参照文献[1],兔血用塑料管收集和用ACD(含86 mmol·L-1柠檬酸钠,111 mmol·L-1葡萄糖,53 mmol·L-1柠檬酸)0.15体积比抗凝,800 r·min-1离心10 min,离心2次,取上清,3 000 r·min-1离心15 min。沉淀中加TyrodeHepes缓冲液(140 mmol·L-1氯化钠,5 mmol·L-1氯化钾,1 mmol·L-1氯化镁,10 mmol·L-1 N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙磺酸,10 mmol·L-1葡萄糖,pH 7.4)调节至血小板数为3×1011～4×1011 L-1。血小板聚集情况用NIKON TE2000-E荧光倒置显微镜观察。血小板悬液(0.2 ml)与药物孵育5 min,然后用凝血酶(500 U·L-1)作用1 min,观察其聚集情况。
2 结 果
显微镜下空白对照(生理盐水组,即不加凝血酶和田七)血小板松散(图1),凝血酶诱导的血小板聚集,血小板粘连成一片(图2),用田七总皂甙作用后,随着药物浓度的增加,血小板逐渐松散,没有聚集合粘连(图3~5)。
3 讨 论 ......
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