多肽：Ｎ－乙酰氨基半乳糖转移酶2真核表达载体的构建及在ＳＨＣ－44细胞的表达

http://www.100md.com 2004年8月1日 金美芳 潘 浩 郭向红 仇 灏 吴士良

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     [摘 要] 目的：为探讨O-糖基化在肿瘤发生发展及转移中的作用和功能，构建pcDNA3/ppGalNAc—T2真核表达质粒并转染人神经胶质瘤细胞SHC-44。方法：采用PCR技术从pDONR201-44得到ppGalNAc-44全长编码序列，亚克隆至真核表达载体pcDNA-3.1，脂质体介导基因转染人神经胶质瘤细胞SHG44细胞，采用RT-PCR法检测重组质粒的表达。结果：酶切图谱分析和基因测序证实pcDNA3.1—T2真核表达质粒构建成功。盯-PCR显示转染细胞有T2的表达。结论：成功构建了真核表达载体pcDNA3.1—T2，并成功转染人SHC-44细胞，为进一步研究PpCalNAcT2的功能奠定了基础。

    [关键词] 多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶2；神经胶质瘤细胞；O-糖基化；真核表达载体

    [中图分类号] R24

    [文献标识码] A

    [文章编号) 1671—7783(2004)04—0277—04

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