葡萄糖脱氢酶连续监测法的研究
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[摘 要]目的:建立葡萄糖脱氢酶连续监测法,优化其检测条件。方法:按酶连续监测法测定要求,对克隆的枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶表达酶液进行测定,确定反应体系的底物浓度、最适pH、反应温度、延滞时间、测定时间、检测范围等。结果:以葡萄糖和NAO+为底物时,用连续监测法检测葡萄糖脱氢酶是可行的。当葡萄糖、NAD+的终浓度分别为100mmol/L和2mmol/L时,在反应pH7.4,37℃,延滞时间30s,测定时间60s等条件下,检测上限可达10000U/L。结论:连续监测法能用于测定葡萄糖脱氢酶,快速简便,结果可靠。
[关键词]葡萄糖脱氢酶;枯草芽孢杆菌;连续监测法
[中图分类号]R329
[文献标识码]A
[文章编号]1671-7783(2004)06-0536-03
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