应用流式细胞术分析ＣＩＫ细胞胞内Ｔｈｌ／Ｔｈ2细胞因子

http://www.100md.com 2005年2月1日 王文红 缪竞诚

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     [摘 要] 目的：建立细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-inducedkiller，CIK)体外扩增的方法，并从单细胞水平分析 CIK细胞的胞内Th1/Th2类因子产生的情况，进一步明确CIK细胞的免疫学特性及其参与的免疫效应机制。方法：取健康人外周血单个核细胞(PBMC)，按一定的时间顺序分别加入IFN-γ、IL-2和CD3单抗，体外扩增CIK细胞，再应用流式细胞术，经刺激、阻断、固定、穿透和标记等过程测定CIK细胞内细胞因子IFN-γ和IL-4水平。结果：外周血单个核细胞加细胞因子培养两周后CD3⁺CD5+增加，培养至第21天、28天未见明显下降；诱导后CD3⁺CD8⁺细胞量与 CD3⁺CD4⁺量相比明显增多；单细胞胞内细胞因子测定显示扩增后的CIK细胞Thl/Th2因子状态明显向Thl偏移。结论：采用多种因子组合刺激外周血单个核细胞，可大量诱导出CD3⁺CD56⁺双阳性细胞，具高度增殖性，是一类新型的免疫过继疗法细胞；其偏移的Thl/Th2因子状态可作为解释其极强的细胞毒作用的理论依据。

    [关键词] 细胞因子诱导的杀伤细胞；Thl/Th2；流式细胞术

    [中图分类号] R—33

    [文献标识码] A

    [文章编号] 1671—7783(2005)01-0031—03

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